周晓辉 韩冲芳 杨富丽等
[摘要] 意图 评论非创性肢体远端缺血预处理联合七氟醚后处理对心肌缺血再灌注维护是否有叠加效果。办法 成年雄性SD大鼠40只，随机分为5组，假手术组（S组）；缺血再灌注组（I/R组）；非创性肢体远端缺血预处理组（NIPC组）；七氟醚后处理组（Spo组）；非创性肢体远端缺血预处理+七氟醚后处理组（NIPC+Spo组）。再灌注120min后检测CK-MB表达及心肌超氧化物歧化酶（SOD）的活性。成果 与I/R组比较，NIPC组、Spo组和NIPC+Spo组CK-MB下降、SOD活性添加（P<0.05）；与NIPC组和Spo组比较， NIPC+Spo组CK-MB水平削减、SOD活性添加（P<0.05）。定论 非创性肢体远端缺血预处理联合七氟醚后处理组对心肌缺血再灌注的维护有叠加效果。
[关键词] 七氟醚后处理；心肌缺血再灌注；非创性肢体远端缺血预处理；SOD
[中图分类号] R654.2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701（2014）11-0016-03
[Abstract] Objective To investigate the effects of non-traumatic ischemic preconditioning combined with Sevoflurane postconditioning on myocardial ischemia-reperfusion（I/R）in rat. Methods Forty male SD rats weighing 250 to 280 g were randomly divided into 5 groups （n=8 each）： Sham operation group （Group S）， ischemia and reperfusion group （Group I/R）， non-traumatic ischemic preconditioning group（Group NIPC）， sevoflurane postconditioning group（Group Spo），non-traumatic ischemic preconditioning combined with Sevoflurane postconditioning group （Group NIPC +Spo）. After being reperfused for 120 minutes， detected blood serum CK-MB level and myocardial SOD expression. Results Compared with the I/R group， the levels of CK-MB decreased（P<0.05）in group NIPC， group Spo and group NIPC +Spo. While SOD expression increased（P<0.05）. Compared with the group NIPC and group Spo，the levels of CK-MB decreased（P<0.05）in group NIPC +Spo. While SOD expression increased（P<0.05）. Conclusion Compared with only non-traumatic ischemic preconditioning or sevoflurane postconditioning， the two methods in combination can increase the protective effects for myocardial ischemia-reperfusion.
[Key words] Sevoflurane postconditioning； Myocardial ischemia-reperfusion； Non-traumatic ischemic preconditioning；SOD
自1986年，Murry发现心肌缺血预处理能够减轻缺血再灌注危害以来，人们发现七氟醚预处理和后处理及非创性肢体远端缺血预处理都对心肌缺血再灌注损害有维护效果[1，2]。本文选用大鼠心肌缺血-再灌注模型，调查血清中CK-MB和心肌安排中SOD活性水平，来研讨非创性肢体远端缺血预处理联合七氟醚后处理是否对缺血再灌注维护有叠加效果。
1 材料与办法
1.1 试验动物
健康雄性SD大鼠40只，体重250～280 g，由山西医科大学动物中心供给。
1.2 模型制备
试验动物称重，腹腔打针3%戊巴比妥钠（45 mg/kg）麻醉，固定于试验台上，颈部正中切断，别离气管后进行气管插管，接ALC-V 8 动物呼吸机（上海奥尔特生物科技有限公司）行机械通气，呼吸机进气口与七氟烷蒸发罐（aeommedvp 3000）相连，潮气量8～10 mL，通气频率60次/min，吸入纯氧，吸呼比1∶2。左边颈总动脉穿刺置管，衔接BI-420F生物机能试验体系（成都泰盟科技有限公司），用于监测有创动脉压及规范Ⅱ导联心电图。于左边胸壁第3、4肋间间隔胸骨左缘约0.5 cm处逐层钝性别脱离胸，去除心包膜，6-0丝线在左心耳下约3 mm处穿过左冠状动脉前降支（LAD），将丝线两端穿过硅胶管，用血管钳推压小管压榨LAD形成缺血，以结扎处远端心前壁呈青紫色或苍白色、ST段举高、T波挺拔为缺血成功标志。缺血30min时松开结扎线，心肌缺血区康复光润、ST段回落>1/2和（或）R波康复为再灌注成功的标志。
1.3 动物分组
试验动物随机分为5组（n=8）：假手术组（S组）、缺血再灌注组（I/R组）、非创性肢体远端缺血预处理组（NIPC组）、七氟醚后处理组（Spo组）和非创性肢体远端缺血预处理联合七氟醚后处理组（NIPC+Spo组）。S组：只穿线不结扎；I/R组：阻断LAD30 min，再灌注120 min。NIPC组：在缺血前阻断右侧股动脉5 min再灌注5 min，三个循环后走LAD缺血30 min，再灌注120 min[3]；Spo组：阻断LAD30 min，再灌注前吸入2%七氟醚15 min，再灌注120 min；NIPC+Spo组：在缺血前阻断右侧股动脉5 min再灌注5 min，三个循环后走LAD缺血30 min，再灌注前吸入2%七氟醚15 min，再灌注120 min[4-8]。
1.4 血清中CK-MB测定
再灌注120 min时，从大鼠左边股动脉取血2 mL，离心后测定血清中CK-MB水平。
1.5 心肌安排病理改变和SOD测定
再灌注120 min取血后，将大鼠处死，取部分缺血区心肌安排，白腊包埋，切片，HE染色，调查各组病理学改变。剩余缺血区心肌，去除包膜，称重后匀浆，离心后取上清液，选用黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性。
1.6 统计学处理
选用SPSS17.0软件剖析数据，计量材料以均数±规范差（x±s）表明，数据进行正态性查验，组间进行单因素方差剖析，两两比较选用LSDt法。P<0.05为差异有统计学含义。
2 成果
与其他4组比较，S组CK-MB（177.44±53.34）U/L含量最低，心肌安排SOD活性（235±21）U/mg最高，差异有统计学含义（P<0.05）；与NIPC组、Spo组和NIPC +Spo组比较，I/R组CK-MB水平增高，心肌安排SOD活性下降，差异有统计学含义（P<0.05）。与NIPC组和Spo组比较，NIPC +Spo组CK-MB水平下降，心肌安排SOD活性升高，差异有统计学含义（P<0.05）。见表1。
光镜下调查心肌安排病理改变，S组心肌安排结构正常，细胞及间质正常。I/R组心肌安排结构紊乱，细胞肿胀，间质水肿。NIPC组与Spo组类似，心肌安排结构轻度紊乱，细胞肿胀和间质水肿水平较轻。NIPC+Spo组心肌安排结构根本正常，细胞结构根本正常。见封三图2。
3 评论
近年来，跟着心脏冠状动脉搭桥手术，心脏支架及溶栓手术的开展，心肌缺血再灌注损害遭到人们越来越多的重视。近年来人们发现药物预处理和后处理，及肢体远端缺血预处理都对心肌缺血再灌注有维护效果，但其对心肌缺血再灌注维护的机制至今不甚清晰[9]。
CK-MB首要散布于心肌安排，心肌损害后释放到血液，是心肌缺血再灌注损害的灵敏目标之一。本试验经过检测心肌缺血再灌注后血清中的CK-MB水平来判别心肌损害程度。成果显现非创性肢体缺血预处理和七氟醚后处理，非创性肢体缺血预处理联合后处理都能显着下降CK-MB水平，削减心肌细胞炎性损害和凋亡[10]。
超氧阴离子自由基是人体内多种生理反应的中心产品，具有极强的氧化才能，是人体氧毒害的重要因素之一。SOD是一种金属酶，能够催化超氧化物转化为氧气和过氧化物，过氧化物会立即被体内的过氧化物酶分解为对人体无害的水。SOD是生物体内铲除自由基的首要物质，能够下降自由基的生成和氧化应激，有抗氧化、按捺凋亡和减缓变老的效果。而心肌缺血再灌注损害正是因为缺血的炎性反应发生很多氧自由基形成氧化损害，引起细胞凋亡和损害。SOD活性添加能够削减心肌缺血再灌注损害，维护心肌。从SOD的活性状况来看，非创性肢体远端缺血预处理和七氟醚后处理都能经过添加SOD的活性来减轻心肌缺血再灌注的损害，维护心肌细胞[11-13]。
本试验研讨成果表明，非创性肢体远端缺血预处理联合七氟醚后处理对心肌缺血再灌注的维护具有叠加效果，其维护效果的添加与SOD活性的升高有关，但对心肌缺血再灌注损害的维护是彼此联络、彼此影响的杂乱网络，其具体的进程和维护机制仍需经过进一步的动物试验证明。
[参考文献]
[1] 赵亚玲，敖虎山. 心肌缺血再灌注损害的研讨进展[J]. 我国循环杂志，2011，26（5）：396-398.
[2] Kodaka M，Johansen JW，Sebel PS. The influence of gender on loss of consciousness with sevoflurane or propofol[J]. Anesth Analg，2005，101（2）：377-381.
[3] 万杋，杨拔闲. 无创性肢体缺血预处理对心肌缺血再灌注损害的影响[J]. 现代中西医结合杂志，2009，18（22）：9-11.
[4] 陈洪涛，李宝金. 不同七氟醚后处理对心肌缺血-再灌注损害的维护效果[J]. 临床麻醉学，2012，28（12）：1216-1219.
[5] 董玥颖，韩冲芳. mKATP对七氟醚后处理大鼠心肌超微结构的影响[J]. 我国现代医师，2013，51（17）：17-19. [6] Yu LN，Yu J. Sevoflurane postcongditioning reduces myocardial reperfusion injury in rat isolated hearts via activation of PI3K/Akt signaling and modulation of Bcl-2 family proteins[J]. Journal of Zhe Jiang Univ Sci B，2010，（9）：661-667.
[7] Yao YT，Fang NX，Shi CX. Sevoflurane postconditioning protects isolated rat hearts against ischemia-reperfusion injury[J]. Chin Med J，2010，123（10）：1320-1328.
[8] 唐莹，刘金东. PI3K-Akt信号通路在七氟醚预处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损害中的效果[J]. 中华麻醉学杂志，2011，31（5）：630-633.
[9] 张力，周成斌. 七氟醚后处理对心肌维护效果的临床研讨[J]. 透析与人工器官，2011，22（1）：38-41.
[10] 杨长顺，周秀萍. cTnI、CK-MB和MB定量检测在急性心肌梗死确诊中的价值[J]. 查验医学与临床，2010， 7（17）：1827-1828.
[11] 刘悦，刘雅. 七氟醚后处理联合七氟醚预处理对急性心肌缺血-再灌注大鼠血浆SOD及MDA的影响[J]. 河北医学，2011，33（3）：329-331.
[12] 王天龙，于德水，张京范. 小剂量尼卡地平对心脏外科围手术期心肌缺血/再灌注损害的维护效果[J]. 中华麻醉学杂志，2002，22（4）：203-206.
[13] 廖锦华，李健玲. 七氟醚预处理对缺血再灌注大鼠心肌活性氧发生的影响及发挥心肌维护效果的机制[J]. 我国病理生理杂志，2011，27（8）：1476-1484.
（收稿日期：2013-12-27）
1.4 血清中CK-MB测定
再灌注120 min时，从大鼠左边股动脉取血2 mL，离心后测定血清中CK-MB水平。
1.5 心肌安排病理改变和SOD测定
再灌注120 min取血后，将大鼠处死，取部分缺血区心肌安排，白腊包埋，切片，HE染色，调查各组病理学改变。剩余缺血区心肌，去除包膜，称重后匀浆，离心后取上清液，选用黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性。
1.6 统计学处理
选用SPSS17.0软件剖析数据，计量材料以均数±规范差（x±s）表明，数据进行正态性查验，组间进行单因素方差剖析，两两比较选用LSDt法。P<0.05为差异有统计学含义。
2 成果
与其他4组比较，S组CK-MB（177.44±53.34）U/L含量最低，心肌安排SOD活性（235±21）U/mg最高，差异有统计学含义（P<0.05）；与NIPC组、Spo组和NIPC +Spo组比较，I/R组CK-MB水平增高，心肌安排SOD活性下降，差异有统计学含义（P<0.05）。与NIPC组和Spo组比较，NIPC +Spo组CK-MB水平下降，心肌安排SOD活性升高，差异有统计学含义（P<0.05）。见表1。
光镜下调查心肌安排病理改变，S组心肌安排结构正常，细胞及间质正常。I/R组心肌安排结构紊乱，细胞肿胀，间质水肿。NIPC组与Spo组类似，心肌安排结构轻度紊乱，细胞肿胀和间质水肿水平较轻。NIPC+Spo组心肌安排结构根本正常，细胞结构根本正常。见封三图2。
3 评论
近年来，跟着心脏冠状动脉搭桥手术，心脏支架及溶栓手术的开展，心肌缺血再灌注损害遭到人们越来越多的重视。近年来人们发现药物预处理和后处理，及肢体远端缺血预处理都对心肌缺血再灌注有维护效果，但其对心肌缺血再灌注维护的机制至今不甚清晰[9]。
CK-MB首要散布于心肌安排，心肌损害后释放到血液，是心肌缺血再灌注损害的灵敏目标之一。本试验经过检测心肌缺血再灌注后血清中的CK-MB水平来判别心肌损害程度。成果显现非创性肢体缺血预处理和七氟醚后处理，非创性肢体缺血预处理联合后处理都能显着下降CK-MB水平，削减心肌细胞炎性损害和凋亡[10]。
超氧阴离子自由基是人体内多种生理反应的中心产品，具有极强的氧化才能，是人体氧毒害的重要因素之一。SOD是一种金属酶，能够催化超氧化物转化为氧气和过氧化物，过氧化物会立即被体内的过氧化物酶分解为对人体无害的水。SOD是生物体内铲除自由基的首要物质，能够下降自由基的生成和氧化应激，有抗氧化、按捺凋亡和减缓变老的效果。而心肌缺血再灌注损害正是因为缺血的炎性反应发生很多氧自由基形成氧化损害，引起细胞凋亡和损害。SOD活性添加能够削减心肌缺血再灌注损害，维护心肌。从SOD的活性状况来看，非创性肢体远端缺血预处理和七氟醚后处理都能经过添加SOD的活性来减轻心肌缺血再灌注的损害，维护心肌细胞[11-13]。
本试验研讨成果表明，非创性肢体远端缺血预处理联合七氟醚后处理对心肌缺血再灌注的维护具有叠加效果，其维护效果的添加与SOD活性的升高有关，但对心肌缺血再灌注损害的维护是彼此联络、彼此影响的杂乱网络，其具体的进程和维护机制仍需经过进一步的动物试验证明。
[参考文献]
[1] 赵亚玲，敖虎山. 心肌缺血再灌注损害的研讨进展[J]. 我国循环杂志，2011，26（5）：396-398.
[2] Kodaka M，Johansen JW，Sebel PS. The influence of gender on loss of consciousness with sevoflurane or propofol[J]. Anesth Analg，2005，101（2）：377-381.
[3] 万杋，杨拔闲. 无创性肢体缺血预处理对心肌缺血再灌注损害的影响[J]. 现代中西医结合杂志，2009，18（22）：9-11.
[4] 陈洪涛，李宝金. 不同七氟醚后处理对心肌缺血-再灌注损害的维护效果[J]. 临床麻醉学，2012，28（12）：1216-1219.
[5] 董玥颖，韩冲芳. mKATP对七氟醚后处理大鼠心肌超微结构的影响[J]. 我国现代医师，2013，51（17）：17-19. [6] Yu LN，Yu J. Sevoflurane postcongditioning reduces myocardial reperfusion injury in rat isolated hearts via activation of PI3K/Akt signaling and modulation of Bcl-2 family proteins[J]. Journal of Zhe Jiang Univ Sci B，2010，（9）：661-667.
[7] Yao YT，Fang NX，Shi CX. Sevoflurane postconditioning protects isolated rat hearts against ischemia-reperfusion injury[J]. Chin Med J，2010，123（10）：1320-1328.
[8] 唐莹，刘金东. PI3K-Akt信号通路在七氟醚预处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损害中的效果[J]. 中华麻醉学杂志，2011，31（5）：630-633.
[9] 张力，周成斌. 七氟醚后处理对心肌维护效果的临床研讨[J]. 透析与人工器官，2011，22（1）：38-41.
[10] 杨长顺，周秀萍. cTnI、CK-MB和MB定量检测在急性心肌梗死确诊中的价值[J]. 查验医学与临床，2010， 7（17）：1827-1828.
[11] 刘悦，刘雅. 七氟醚后处理联合七氟醚预处理对急性心肌缺血-再灌注大鼠血浆SOD及MDA的影响[J]. 河北医学，2011，33（3）：329-331.
[12] 王天龙，于德水，张京范. 小剂量尼卡地平对心脏外科围手术期心肌缺血/再灌注损害的维护效果[J]. 中华麻醉学杂志，2002，22（4）：203-206.
[13] 廖锦华，李健玲. 七氟醚预处理对缺血再灌注大鼠心肌活性氧发生的影响及发挥心肌维护效果的机制[J]. 我国病理生理杂志，2011，27（8）：1476-1484.
（收稿日期：2013-12-27）
1.4 血清中CK-MB测定
再灌注120 min时，从大鼠左边股动脉取血2 mL，离心后测定血清中CK-MB水平。
1.5 心肌安排病理改变和SOD测定
再灌注120 min取血后，将大鼠处死，取部分缺血区心肌安排，白腊包埋，切片，HE染色，调查各组病理学改变。剩余缺血区心肌，去除包膜，称重后匀浆，离心后取上清液，选用黄嘌呤氧化酶法测定SOD活性。
1.6 统计学处理
选用SPSS17.0软件剖析数据，计量材料以均数±规范差（x±s）表明，数据进行正态性查验，组间进行单因素方差剖析，两两比较选用LSDt法。P<0.05为差异有统计学含义。
2 成果
与其他4组比较，S组CK-MB（177.44±53.34）U/L含量最低，心肌安排SOD活性（235±21）U/mg最高，差异有统计学含义（P<0.05）；与NIPC组、Spo组和NIPC +Spo组比较，I/R组CK-MB水平增高，心肌安排SOD活性下降，差异有统计学含义（P<0.05）。与NIPC组和Spo组比较，NIPC +Spo组CK-MB水平下降，心肌安排SOD活性升高，差异有统计学含义（P<0.05）。见表1。
光镜下调查心肌安排病理改变，S组心肌安排结构正常，细胞及间质正常。I/R组心肌安排结构紊乱，细胞肿胀，间质水肿。NIPC组与Spo组类似，心肌安排结构轻度紊乱，细胞肿胀和间质水肿水平较轻。NIPC+Spo组心肌安排结构根本正常，细胞结构根本正常。见封三图2。
3 评论
近年来，跟着心脏冠状动脉搭桥手术，心脏支架及溶栓手术的开展，心肌缺血再灌注损害遭到人们越来越多的重视。近年来人们发现药物预处理和后处理，及肢体远端缺血预处理都对心肌缺血再灌注有维护效果，但其对心肌缺血再灌注维护的机制至今不甚清晰[9]。
CK-MB首要散布于心肌安排，心肌损害后释放到血液，是心肌缺血再灌注损害的灵敏目标之一。本试验经过检测心肌缺血再灌注后血清中的CK-MB水平来判别心肌损害程度。成果显现非创性肢体缺血预处理和七氟醚后处理，非创性肢体缺血预处理联合后处理都能显着下降CK-MB水平，削减心肌细胞炎性损害和凋亡[10]。
超氧阴离子自由基是人体内多种生理反应的中心产品，具有极强的氧化才能，是人体氧毒害的重要因素之一。SOD是一种金属酶，能够催化超氧化物转化为氧气和过氧化物，过氧化物会立即被体内的过氧化物酶分解为对人体无害的水。SOD是生物体内铲除自由基的首要物质，能够下降自由基的生成和氧化应激，有抗氧化、按捺凋亡和减缓变老的效果。而心肌缺血再灌注损害正是因为缺血的炎性反应发生很多氧自由基形成氧化损害，引起细胞凋亡和损害。SOD活性添加能够削减心肌缺血再灌注损害，维护心肌。从SOD的活性状况来看，非创性肢体远端缺血预处理和七氟醚后处理都能经过添加SOD的活性来减轻心肌缺血再灌注的损害，维护心肌细胞[11-13]。
本试验研讨成果表明，非创性肢体远端缺血预处理联合七氟醚后处理对心肌缺血再灌注的维护具有叠加效果，其维护效果的添加与SOD活性的升高有关，但对心肌缺血再灌注损害的维护是彼此联络、彼此影响的杂乱网络，其具体的进程和维护机制仍需经过进一步的动物试验证明。
[参考文献]
[1] 赵亚玲，敖虎山. 心肌缺血再灌注损害的研讨进展[J]. 我国循环杂志，2011，26（5）：396-398.
[2] Kodaka M，Johansen JW，Sebel PS. The influence of gender on loss of consciousness with sevoflurane or propofol[J]. Anesth Analg，2005，101（2）：377-381.
[3] 万杋，杨拔闲. 无创性肢体缺血预处理对心肌缺血再灌注损害的影响[J]. 现代中西医结合杂志，2009，18（22）：9-11.
[4] 陈洪涛，李宝金. 不同七氟醚后处理对心肌缺血-再灌注损害的维护效果[J]. 临床麻醉学，2012，28（12）：1216-1219.
[5] 董玥颖，韩冲芳. mKATP对七氟醚后处理大鼠心肌超微结构的影响[J]. 我国现代医师，2013，51（17）：17-19. [6] Yu LN，Yu J. Sevoflurane postcongditioning reduces myocardial reperfusion injury in rat isolated hearts via activation of PI3K/Akt signaling and modulation of Bcl-2 family proteins[J]. Journal of Zhe Jiang Univ Sci B，2010，（9）：661-667.
[7] Yao YT，Fang NX，Shi CX. Sevoflurane postconditioning protects isolated rat hearts against ischemia-reperfusion injury[J]. Chin Med J，2010，123（10）：1320-1328.
[8] 唐莹，刘金东. PI3K-Akt信号通路在七氟醚预处理减轻大鼠离体心脏缺血再灌注损害中的效果[J]. 中华麻醉学杂志，2011，31（5）：630-633.
[9] 张力，周成斌. 七氟醚后处理对心肌维护效果的临床研讨[J]. 透析与人工器官，2011，22（1）：38-41.
[10] 杨长顺，周秀萍. cTnI、CK-MB和MB定量检测在急性心肌梗死确诊中的价值[J]. 查验医学与临床，2010， 7（17）：1827-1828.
[11] 刘悦，刘雅. 七氟醚后处理联合七氟醚预处理对急性心肌缺血-再灌注大鼠血浆SOD及MDA的影响[J]. 河北医学，2011，33（3）：329-331.
[12] 王天龙，于德水，张京范. 小剂量尼卡地平对心脏外科围手术期心肌缺血/再灌注损害的维护效果[J]. 中华麻醉学杂志，2002，22（4）：203-206.
[13] 廖锦华，李健玲. 七氟醚预处理对缺血再灌注大鼠心肌活性氧发生的影响及发挥心肌维护效果的机制[J]. 我国病理生理杂志，2011，27（8）：1476-1484.
（收稿日期：2013-12-27）
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